راه اندازی روش real-time pcr برای تشخیص و تعیین کمی ویروس سرخک با استفاده از ژن f

سابقه و هدف: با وجود کنترل بیماری سرخک در جهان، اما گزارش هایی از ابتلا به این ویروس در جمعیت های واکسینه شده وجود دارد. بنابراین تشخیص دقیق و به موقع این ویروس ضروری است. روش های جدید مولکولی در تشخیص ویروس ارائه شده است که توان تعیین مقدار این ویروس را ندارند. هدف از این پژوهش راه اندازی روش real-time pcr با استفاده از ژن f ویروس سرخک می باشد. مواد و روش ها: این مطالعه با طراحی دو پرایمر و یک پروب راه اندازی و از ژن f کلون شده در داخل پلاسمید pet-22b(+) استفاده گردید. رقت های متوالی در مبنای 10 از پلاسمید استاندارد حاوی ژن آماده شد و منحنی استاندارد رسم گردید. جهت انجام پروژه از کیت taq man ساخت شرکت abi استفاده گردید. یافته ها: حداقل 30 ذره ویروسی در هر واکنش مشخص گردید و در محدوده رقت های 4-10تا 9- 10 معادل ( 101×3- 106×3) نسخه بهترین حالت خطی برای منحنی استاندارد دیده شد. نتیجه گیری: نتایج نشان داد که تکنیک real-time pcr می تواند به عنوان روشی بسیار اختصاصی و سریع برای تشخیص و تعیین تعداد ویروس سرخک از نمونه های حاوی این ویروس به کار رود.